融合蛋白純化試劑盒操作視頻
2021-12-24
2021-12-24
操作流程 接種50ul菌種至200ml抗性培養基中,37℃培養過夜。 次日加入新鮮抗性培養基至800ml,培養1-2h至細菌活力最旺盛。 加入200ul的1M IPTG(28℃或37℃)誘導3.5h。 收集菌體(66轉/秒×15min),棄上清,加入30ml抽提液懸浮菌體,加入終濃度1mM PMSF和終濃度0.5mM EDTA(his融合蛋白抽提時不加EDTA),冰浴條件下超聲波200W破碎6min。 搖床4℃孵育 1h。 高速離心,133轉/秒×15min。取上清,加入400ul beads 4℃結合過夜。 收集beads(33轉/
2021-11-30